X-Gal, também conhecida como 5-bromo-4-cloro-3-indoxil-β-D-galactopiranosídeo é um glicosídeo artificial análogo à
lactose e um substrato cromógeno para a enzima β-galactosidase. A enzima β-galactosidase hidrolisa X-Gal, formando
galactose e 5-bromo-4-cloro-3-indoxil. O 5-bromo-4-cloro-3-indoxil]] na presença de oxigênio do ar é oxidado e convertido no corante azul 5,5-dibromo-4,4-dicloro-índigo. Na bioquímica, o X-Gal é utilizado para medição qualitativa da atividade da β-galactosidase benutzt. Para medição quantitativa é utilizado, por sua vez, o substrato o-Nitrofenil-β-D-galactopiranosídeo (ONPG). . Na
biologia molecular o X-Gal é utilizado para triagem azul-branca (blue-White screening). Em diversos vetores de clongem, um sítio de clonagem múltipla (Multiple Cloning Site) está presente no meio da sequência codificadora do fragmento α (parte N-terminal) da β-galactosidase. Nesse sítio é possível colocar
DNA exógeno de interesse, como fragmentos ...