HEK293 Cells
Zellinie
Transfektion
Niere
Rezeptor, EphA3
Patch-Clamp-Techniken
Molekülsequenzdaten
Protein Binding
Rekombinante Proteine
Amino Acid Sequence
Zellmembran
Protein Structure, Tertiary
Calcium
Zellen, kultivierte
Protein Transport
Signal Transduction
Mutation
Ion Channel Gating
TRPC-Kationenkanäle
Phosphorylation
Rekombinant-Fusions-Proteine
DNA, komplementäre
Membrane Potentials
Blotting, Western
Immunopräzipitation
Arrestins
Dose-Response Relationship, Drug
Mikroskopie, konfokale
Grün fluoreszierende Proteine
Elektrophysiologie
Rezeptoren, G-Protein-gekoppelte
Klonierung, molekulare
Proteinisoformen
Kinetics
Membranproteine
Radioligandenprobe
Ether-A-Go-Go-Kaliumkanäle
Gene Expression Regulation
Cyclo-AMP
Mutagenese, lokalspezifische
Base Sequence
Enzyme Activation
Calciumkanäle
TRPV-Kationenkanäle
Receptors, Purinergic P2X7
Gene Expression
RNA, Small-Interfering-
Kaliumkanäle, einwärts-gleichrichtende
Binding Sites
Lumineszenzproteine
RNA, Messenger-
Liganden
Endocytosis
Transportproteine für organische Kationen
Rezeptoren, calciumempfindliche
Twoi-hybrid-system-Techniken
Kaliumkanäle
Proteinuntereinheiten
Mikroskopie, Fluoreszenz-
Natriumkanäle
Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer
Rezeptor, EphB3
Glycosylation
Sequence Homology, Amino Acid
COS-Zellen
Rezeptoren, Serotonin-, 5-HT3-
TRPM-Kationenkanäle
NAV1.5 Voltage-Gated Sodium Channel
Biotinylierung
Kaliumkanäle, spannungsabhängige
Cyclo-AMP-abhängige Proteinkinasen
Aminosäuresubstitution
Reverse Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion
GTP-Bindungsprotein-alpha-Subunits, Gq-G11
Lymphozytenantigen 96
CHO-Zellen
Calcium Signaling
GTP-bindende Proteine
Mutation, Missense
Kv1.5-Kaliumkanal
Hamster
Neuronen
Toll-ähnlicher Rezeptor 2
Carrierproteine
Biological Transport
Serin
HEK293 Zellen, auch bekannt als human embryonale Nierenzellen, sind eine immortalisierte Zelllinie, die aus humanen Fetalnierempfindungen abgeleitet wurden. Die Zellen wurden erstmals im Jahr 1977 etabliert und sind seitdem ein weit verbreitetes Modellsystem in der Molekularbiologie und Biochemie geworden.
HEK293 Zellen haben mehrere Eigenschaften, die sie zu einem beliebten Modellsystem machen: Sie wachsen schnell und sind relativ einfach zu kultivieren, was sie zu einer guten Wahl für groß angelegte Zellkulturexperimente macht. Darüber hinaus exprimieren HEK293 Zellen eine Vielzahl von Rezeptoren und Signalmolekülen auf ihrer Oberfläche, was sie zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung von zellulären Signalwegen macht.
Eine weitere wichtige Eigenschaft von HEK293 Zellen ist ihre Fähigkeit, fremde DNA effizient aufzunehmen und zu exprimieren. Dies wird durch das Vorhandensein des Proteins SV40 Large T-Antigen vermittelt, das die DNA-Replikation und -Transkription in den Zellen fördert. Aufgrund dieser Eigenschaft werden HEK293 Zellen häufig für die Produktion rekombinanter Proteine verwendet.
Es ist wichtig zu beachten, dass HEK293 Zellen nicht mehr als humane embryonale Zellen gelten, da sie durch Transformation immortalisiert wurden und nicht mehr den gleichen genetischen Eigenschaften wie die ursprünglichen Zellen entsprechen. Dennoch gibt es immer noch Bedenken hinsichtlich der Ethik und Sicherheit bei der Verwendung von HEK293 Zellen in der Forschung, insbesondere im Hinblick auf potenzielle Risiken für die menschliche Gesundheit.
Die Nieren sind paarige, bohnenförmige Organe, die hauptsächlich für die Blutfiltration und Harnbildung zuständig sind. Jede Niere ist etwa 10-12 cm lang und wiegt zwischen 120-170 Gramm. Sie liegen retroperitoneal, das heißt hinter dem Peritoneum, in der Rückseite des Bauchraums und sind durch den Fascia renalis umhüllt.
Die Hauptfunktion der Nieren besteht darin, Abfallstoffe und Flüssigkeiten aus dem Blut zu filtern und den so entstandenen Urin zu produzieren. Dieser Vorgang findet in den Nephronen statt, den funktionellen Einheiten der Niere. Jedes Nephron besteht aus einem Glomerulus (einer knäuelartigen Ansammlung von Blutgefäßen) und einem Tubulus (einem Hohlrohr zur Flüssigkeitsbewegung).
Die Nieren spielen auch eine wichtige Rolle bei der Regulierung des Wasser- und Elektrolythaushalts, indem sie überschüssiges Wasser und Mineralstoffe aus dem Blutkreislauf entfernen oder zurückhalten. Des Weiteren sind die Nieren an der Synthese verschiedener Hormone beteiligt, wie zum Beispiel Renin, Erythropoetin und Calcitriol, welche die Blutdruckregulation, Blutbildung und Kalziumhomöostase unterstützen.
Eine Nierenfunktionsstörung oder Erkrankung kann sich negativ auf den gesamten Organismus auswirken und zu verschiedenen Komplikationen führen, wie beispielsweise Flüssigkeitsansammlungen im Körper (Ödeme), Bluthochdruck, Elektrolytstörungen und Anämie.
Die Patch-Clamp-Technik ist ein hochpräzises Verfahren in der Elerophysiologie, mit dem die elektrischen Eigenschaften von Zellen, insbesondere Ionenkanäle, untersucht werden können. Dabei wird eine gläserne Mikropipette an die Zellmembran angepresst und eine Spannungsdifferenz erzeugt. Dadurch bildet sich zwischen Pipette und Zelle eine "Gabel" (engl. "patch"), die es ermöglicht, die elektrischen Eigenschaften der Zellmembran zu messen oder auch einzelne Ionenkanäle gezielt zu öffnen und zu schließen.
Es gibt verschiedene Varianten der Patch-Clamp-Technik, abhängig davon, ob die Messung an einer intakten Zelle (Cell-attach- oder whole-cell-Technik), an einer isolierten Zellmembran (inside-out-Technik) oder an einem Ausschnitt der Zellmembran (outside-out-Technik) durchgeführt wird.
Die Patch-Clamp-Technik ist ein wichtiges Instrument in der neuro- und kardiophysiologischen Forschung, um die Funktionsweise von Ionenkanälen und deren Rolle bei verschiedenen physiologischen Prozessen wie Erregungsleitung und -ausbreitung, Hormonsekretion oder Sinneswahrnehmung zu verstehen.
Molekülsequenzdaten beziehen sich auf die Reihenfolge der Bausteine in Biomolekülen wie DNA, RNA oder Proteinen. Jedes Molekül hat eine einzigartige Sequenz, die seine Funktion und Struktur bestimmt.
In Bezug auf DNA und RNA besteht die Sequenz aus vier verschiedenen Nukleotiden (Adenin, Thymin/Uracil, Guanin und Cytosin), während Proteine aus 20 verschiedenen Aminosäuren bestehen. Die Sequenzdaten werden durch Laborverfahren wie DNA-Sequenzierung oder Massenspektrometrie ermittelt und können für Anwendungen in der Genetik, Biochemie und Pharmakologie verwendet werden.
Die Analyse von Molekülsequenzdaten kann zur Identifizierung genetischer Variationen, zur Vorhersage von Proteinstrukturen und -funktionen sowie zur Entwicklung neuer Medikamente beitragen.
Eine Aminosäuresequenz ist die genau festgelegte Reihenfolge der verschiedenen Aminosäuren, aus denen ein Proteinmolekül aufgebaut ist. Sie wird direkt durch die Nukleotidsequenz des entsprechenden Gens bestimmt und spielt eine zentrale Rolle bei der Funktion eines Proteins.
Die Aminosäuren sind über Peptidbindungen miteinander verknüpft, wobei die Carboxylgruppe (-COOH) einer Aminosäure mit der Aminogruppe (-NH2) der nächsten reagiert, wodurch eine neue Peptidbindung entsteht und Wasser abgespalten wird. Diese Reaktion wiederholt sich, bis die gesamte Kette der Proteinsequenz synthetisiert ist.
Die Aminosäuresequenz eines Proteins ist einzigartig und dient als wichtiges Merkmal zur Klassifizierung und Identifizierung von Proteinen. Sie bestimmt auch die räumliche Struktur des Proteins, indem sie hydrophobe und hydrophile Bereiche voneinander trennt und so die Sekundär- und Tertiärstruktur beeinflusst.
Abweichungen in der Aminosäuresequenz können zu Veränderungen in der Proteinstruktur und -funktion führen, was wiederum mit verschiedenen Krankheiten assoziiert sein kann. Daher ist die Bestimmung der Aminosäuresequenz von großer Bedeutung für das Verständnis der Funktion von Proteinen und deren Rolle bei Erkrankungen.
Calcium ist ein essentielles Mineral, das für den Menschen unentbehrlich ist. Im Körper befindet sich etwa 99% des Calciums in den Knochen und Zähnen, wo es für deren Festigkeit und Stabilität sorgt. Das übrige 1% verteilt sich im Blut und in den Geweben. Dort ist Calcium an der Reizübertragung von Nervenimpulsen, der Muskelkontraktion, der Blutgerinnung und verschiedenen Enzymreaktionen beteiligt. Der Calciumspiegel im Blut wird durch Hormone wie Parathormon, Calcitriol und Calcitonin reguliert. Eine ausreichende Calciumzufuhr ist wichtig für die Knochengesundheit und zur Vorbeugung von Osteoporose. Die empfohlene tägliche Zufuhrmenge von Calcium beträgt für Erwachsene zwischen 1000 und 1300 mg.
Eine Mutation ist eine dauerhafte, zufällige Veränderung der DNA-Sequenz in den Genen eines Organismus. Diese Veränderungen können spontan während des normalen Wachstums und Entwicklungsprozesses auftreten oder durch äußere Einflüsse wie ionisierende Strahlung, chemische Substanzen oder Viren hervorgerufen werden.
Mutationen können verschiedene Formen annehmen, wie z.B. Punktmutationen (Einzelnukleotidänderungen), Deletionen (Entfernung eines Teilstücks der DNA-Sequenz), Insertionen (Einfügung zusätzlicher Nukleotide) oder Chromosomenaberrationen (größere Veränderungen, die ganze Gene oder Chromosomen betreffen).
Die Auswirkungen von Mutationen auf den Organismus können sehr unterschiedlich sein. Manche Mutationen haben keinen Einfluss auf die Funktion des Gens und werden daher als neutral bezeichnet. Andere Mutationen können dazu führen, dass das Gen nicht mehr oder nur noch eingeschränkt funktioniert, was zu Krankheiten oder Behinderungen führen kann. Es gibt jedoch auch Mutationen, die einen Vorteil für den Organismus darstellen und zu einer verbesserten Anpassungsfähigkeit beitragen können.
Insgesamt spielen Mutationen eine wichtige Rolle bei der Evolution von Arten, da sie zur genetischen Vielfalt beitragen und so die Grundlage für natürliche Selektion bilden.
Ion channel gating bezieht sich auf den Prozess der Aktivierung oder Inaktivierung von Ionenkanälen, die sich in der Zellmembran befinden. Diese Kanäle sind für den kontrollierten Ein- und Austritt von Ionen wie Natrium, Kalium und Calcium verantwortlich, was wiederum entscheidend für die Erregbarkeit von Zellen, insbesondere von Nerven- und Muskelzellen, ist.
Das Gating oder Öffnen und Schließen der Ionenkanäle wird durch verschiedene Stimuli wie Spannungsänderungen (Voltage-gated), Ligandenbindung (Ligand-gated) oder mechanische Reize (Mechanosensitive) gesteuert. Die Aktivierung des Gatings ermöglicht den Durchtritt von Ionen, was zu Änderungen des Membranpotentials führt und so elektrische Signale weiterleitet. Das Verständnis der Mechanismen des Ion Channel Gamings ist daher von großer Bedeutung für die Neurowissenschaften und die Entwicklung von Medikamenten, die auf Ionenkanäle abzielen.
In der Molekularbiologie bezieht sich der Begriff "komplementäre DNA" (cDNA) auf eine DNA-Sequenz, die das komplementäre Gegenstück zu einer RNA-Sequenz darstellt. Diese cDNA wird durch die reverse Transkription von mRNA (messenger RNA) erzeugt, einem Prozess, bei dem die RNA in DNA umgeschrieben wird.
Im Detail: Die komplementäre DNA ist eine einzelsträngige DNA, die synthetisiert wird, indem ein Enzym namens reverse Transkriptase die mRNA als Vorlage verwendet. Die Basenpaarung von RNA und DNA erfolgt nach den üblichen Regeln: Adenin (A) paart sich mit Thymin (T) und Uracil (U) in RNA paart sich mit Guanin (G). Durch diesen Prozess wird die einzelsträngige RNA in eine komplementäre DNA umgeschrieben, die dann weiter verarbeitet werden kann, z.B. durch Klonierung oder Sequenzierungsverfahren.
Die Erzeugung von cDNA ist ein wichtiges Verfahren in der Molekularbiologie und Genetik, insbesondere bei der Untersuchung eukaryotischer Gene, da diese oft durch Introns unterbrochen sind, die in der mRNA nicht vorhanden sind. Die cDNA-Technik ermöglicht es daher, genaue Sequenzinformationen über das exprimierte Gen zu erhalten, ohne dass störende Intron-Sequenzen vorhanden sind.
Membranpotentiale sind elektrische Spannungen, die zwischen der Innen- und Außenseite einer biologischen Zellmembran entstehen. Diese Spannung resultiert aus der ungleichen Verteilung von Ionen, wie Natrium (Na+), Kalium (K+) und Chlorid (Cl-), auf beiden Seiten der Membran. Die Membran ist semipermeabel, das heißt, sie lässt bestimmte Ionen durch spezifische Kanäle oder Transporter passieren, während andere blockiert werden.
Im Ruhezustand stellt sich ein bestimmtes Membranpotential ein, das sogenannte Ruhemembranpotential. In den meisten Neuronen und Muskelzellen beträgt dieses Potential etwa -70 mV auf der Innenseite der Zellmembran relativ zur Außenseite. Wenn die Membran erregt wird, zum Beispiel durch einen Reiz in Nervenzellen, öffnen sich spannungsabhängige Ionenkanäle, und zusätzliche Ionen strömen ein oder aus der Zelle. Dadurch verändert sich das Membranpotential, was als Aktionspotential bezeichnet wird.
Die Messung und Untersuchung von Membranpotentialen sind wichtige Aspekte der Neurophysiologie und Elektrophysiologie, da sie Einblicke in die Funktionsweise von Nervenzellen und Muskelzellen ermöglichen.
Western Blotting ist ein etabliertes Laborverfahren in der Molekularbiologie und Biochemie, das zur Detektion und Quantifizierung spezifischer Proteine in komplexen Proteingemischen verwendet wird.
Das Verfahren umfasst mehrere Schritte: Zuerst werden die Proteine aus den Proben (z. B. Zellkulturen, Gewebehomogenaten) extrahiert und mithilfe einer Elektrophorese in Abhängigkeit von ihrer Molekulargewichtsverteilung getrennt. Anschließend werden die Proteine auf eine Membran übertragen (Blotting), wo sie fixiert werden.
Im nächsten Schritt erfolgt die Detektion der Zielproteine mithilfe spezifischer Antikörper, die an das Zielprotein binden. Diese Antikörper sind konjugiert mit einem Enzym, das eine farbige oder lumineszierende Substratreaktion katalysiert, wodurch das Zielprotein sichtbar gemacht wird.
Die Intensität der Farbreaktion oder Lumineszenz ist direkt proportional zur Menge des detektierten Proteins und kann quantifiziert werden, was die Sensitivität und Spezifität des Western Blotting-Verfahrens ausmacht. Es wird oft eingesetzt, um Proteinexpressionsniveaus in verschiedenen Geweben oder Zelllinien zu vergleichen, posttranslationale Modifikationen von Proteinen nachzuweisen oder die Reinheit von proteinreichen Fraktionen zu überprüfen.
Immunopräzipitation ist ein Laborverfahren in der Molekularbiologie und Immunologie, bei dem Antikörper zum Präzipitieren (ausfallen lassen) bestimmter Antigene aus einer Lösung verwendet werden. Dabei wird eine Antikörpersuspension mit der zu untersuchenden Probe inkubiert, um die spezifischen Antigen-Antikörper-Komplexe zu bilden. Durch Zentrifugation können diese anschließend von den ungebundenen Proteinen getrennt werden. Das so gewonnene Präzipitat kann dann weiter untersucht und quantifiziert werden, um Rückschlüsse auf die Menge oder Art des vorhandenen Antigens in der Probe zu ziehen. Diese Methode wird oft bei diagnostischen Tests eingesetzt, um verschiedene Proteine oder andere antigenische Moleküle nachzuweisen.
Arrestins sind eine Familie von Proteinen, die eine wichtige Rolle in der Signaltransduktion spielen, indem sie die Aktivität von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs) regulieren. Es gibt zwei Hauptklassen von Arrestins: β-Arrestin-1 und β-Arrestin-2 (auch als Arrestin-2 und Arrestin-3 bezeichnet) sowie eine weitere Klasse, die visuelle Arrestine, die in retinalen Signaltransduktionswegen vorkommen.
Nach der Aktivierung eines GPCRs durch ein Ligand-Bindungsereignis bindet β-Arrestin an den Rezeptor und verhindert dessen weitere Interaktion mit G-Proteinen, wodurch die Signalübertragung beendet wird. Dieser Prozess wird als Desensitivierung bezeichnet. Darüber hinaus fungieren Arrestine auch als Adapterproteine, die an der Endozytose des Rezeptors beteiligt sind und ihn zu intrazellulären Kompartimenten transportieren, wo er recycelt oder zur Degradation markiert werden kann.
Durch ihre Bindung an GPCRs können Arrestine zudem die Aktivierung weiterer Signalwege initiieren, wie zum Beispiel MAPK-Signalwege (Mitogen-aktivierte Proteinkinase), was zu verschiedenen zellulären Reaktionen führt. Aufgrund ihrer vielfältigen Funktionen in der Regulation von GPCRs sind Arrestine ein aktives Forschungsgebiet, und es wird angenommen, dass sie an der Entwicklung neuer Therapeutika beteiligt sein könnten.
Die Dosis-Wirkungs-Beziehung (engl.: dose-response relationship) bei Arzneimitteln beschreibt den Zusammenhang zwischen der Menge oder Konzentration eines verabreichten Arzneimittels (Dosis) und der daraus resultierenden physiologischen oder pharmakologischen Wirkung im Körper (Antwort).
Die Dosis-Wirkungs-Beziehung kann auf verschiedene Weise dargestellt werden, zum Beispiel durch Dosis-Wirkungs-Kurven. Diese Kurven zeigen, wie sich die Stärke oder Intensität der Wirkung in Abhängigkeit von der Dosis ändert.
Eine typische Dosis-Wirkungs-Kurve steigt zunächst an, was bedeutet, dass eine höhere Dosis zu einer stärkeren Wirkung führt. Bei noch höheren Dosen kann die Kurve jedoch abflachen (Plateau) oder sogar wieder abfallen (Toxizität), was auf unerwünschte oder schädliche Wirkungen hinweist.
Die Kenntnis der Dosis-Wirkungs-Beziehung ist wichtig für die sichere und effektive Anwendung von Arzneimitteln, da sie dabei hilft, die optimale Dosis zu bestimmen, um eine therapeutische Wirkung zu erzielen, ohne gleichzeitig unerwünschte oder toxische Wirkungen hervorzurufen.
Confocale Mikroskopie ist ein Verfahren der Lichtmikroskopie, bei dem die Lichtquelle und der Detektor durch ein pinhole-förmiges Loch (die Konfokalapertur) so angeordnet sind, dass nur Licht aus einem scharf abgegrenzten Bereich des Präparats detektiert wird. Diese Anordnung minimiert die Hintergrundfluoreszenz und erhöht den Kontrast, wodurch optische Schnitte mit hoher Auflösung durch das Präparat erzeugt werden können. Dies ermöglicht es, dreidimensionale Bilder von Proben zu erstellen und die laterale und axiale Auflösung im Vergleich zur konventionellen Weitfeldmikroskopie zu verbessern. Confocale Mikroskopie wird in den Lebenswissenschaften häufig eingesetzt, um fluoreszierende Marker in Zellen und Geweben zu lokalisieren und die Morphologie von biologischen Strukturen aufzuklären.
Green Fluorescent Protein (Grünes Fluoreszierendes Protein, GFP) ist ein Protein, das ursprünglich aus der Meeresqualle Aequorea victoria isoliert wurde. Es fluoresziert grün, wenn es mit blauem oder ultraviolettem Licht bestrahlt wird. Das Gen für dieses Protein kann in andere Organismen eingebracht werden, um sie markieren und beobachten zu können. Dies ist besonders nützlich in der Molekularbiologie und Zellbiologie, wo es zur Untersuchung von Protein-Protein-Wechselwirkungen, Genexpression, Proteinlokalisierung und zellulären Dynamiken eingesetzt wird. Die Entdeckung und Charakterisierung des GFP wurde mit dem Nobelpreis für Chemie im Jahr 2008 ausgezeichnet.
Elektrophysiologie ist ein Fachgebiet der Medizin, das sich mit der Untersuchung und Aufzeichnung der elektrischen Aktivität von lebenden Zellen, Geweben und Organen befasst. Insbesondere konzentriert es sich auf die Erforschung der elektrischen Eigenschaften von Herzmuskel- und Nervenzellen, um Erkrankungen wie Herzrhythmusstörungen, neurologische Erkrankungen und Muskelerkrankungen zu diagnostizieren und zu behandeln.
In der klinischen Praxis wird die Elektrophysiologie häufig eingesetzt, um Herzrhythmusstörungen wie Vorhofflimmern, Kammerflimmern oder Herzrasen zu diagnostizieren und zu behandeln. Dazu werden dünne Elektrodenkatheter in das Herz eingeführt, um die elektrische Aktivität des Herzens aufzuzeichnen und die Quelle der Rhythmusstörung zu lokalisieren. Anhand dieser Informationen kann der Arzt dann gezielt behandeln, zum Beispiel durch eine Ablation, bei der das erkrankte Gewebe zerstört wird, um den normalen Herzrhythmus wiederherzustellen.
Die Elektrophysiologie ist auch ein wichtiges Forschungsgebiet in der Neurowissenschaft, wo sie eingesetzt wird, um die elektrischen Eigenschaften von Nervenzellen und Gehirnarealen zu untersuchen und Erkrankungen wie Epilepsie, Parkinson und andere neurologische Störungen besser zu verstehen.
Molekulare Klonierung bezieht sich auf ein Laborverfahren in der Molekularbiologie, bei dem ein bestimmtes DNA-Stück (z.B. ein Gen) aus einer Quellorganismus-DNA isoliert und in einen Vektor (wie ein Plasmid oder ein Virus) eingefügt wird, um eine Klonbibliothek zu erstellen. Die Klonierung ermöglicht es, das DNA-Stück zu vervielfältigen, zu sequenzieren, zu exprimieren oder zu modifizieren. Dieses Verfahren ist wichtig für verschiedene Anwendungen in der Grundlagenforschung, Biotechnologie und Medizin, wie beispielsweise die Herstellung rekombinanter Proteine, die Genanalyse und Gentherapie.
In der Pharmakologie und Toxikologie bezieht sich "Kinetik" auf die Studie der Geschwindigkeit und des Mechanismus, mit dem chemische Verbindungen wie Medikamente im Körper aufgenommen, verteilt, metabolisiert und ausgeschieden werden. Es umfasst vier Hauptphasen: Absorption (Aufnahme), Distribution (Transport zum Zielort), Metabolismus (Verstoffwechselung) und Elimination (Ausscheidung). Die Kinetik hilft, die richtige Dosierung eines Medikaments zu bestimmen und seine Wirkungen und Nebenwirkungen vorherzusagen.
Membranproteine sind Proteine, die sich in der Lipidbilayer-Membran von Zellen oder intrazellulären Organellen befinden. Sie durchdringen oder sind mit der Hydrophobischen Membran verbunden und spielen eine wichtige Rolle bei zellulären Funktionen, wie dem Transport von Molekülen, Signaltransduktion, Zell-Zell-Kommunikation und Erkennung. Membranproteine können in integral (dauerhaft eingebettet) oder peripher (vorübergehend assoziiert) eingeteilt werden, je nachdem, ob sie die Membran direkt durch eine hydrophobe Domäne stabilisieren oder über Wechselwirkungen mit anderen Proteinen assoziiert sind.
Ether à Go-Go-Kaliumkanäle, auch bekannt als Kv10.1 oder EAG1-Kanäle, sind eine Klasse von Kaliumkanälen, die in verschiedenen Geweben im menschlichen Körper gefunden werden können, einschließlich des Gehirns und des Herzens. Sie spielen eine wichtige Rolle bei der Regulierung der elektrischen Aktivität von Zellen und sind dafür bekannt, dass sie an der Entstehung verschiedener Krankheiten beteiligt sind, wie zum Beispiel Epilepsie und Krebs.
Die Ether à Go-Go-Kaliumkanäle verdanken ihren Namen einer Mutation im gleichnamigen Gen, die bei Fruchtfliegen zu einem auffälligen Tanzverhalten führt (daher der Name "Ether à Go-Go"). Diese Kaliumkanäle sind für ihre ungewöhnliche Empfindlichkeit gegenüber verschiedenen Arten von Medikamenten und chemischen Substanzen bekannt, einschließlich einiger lokaler Anästhetika und Antidepressiva.
Insgesamt spielen Ether à Go-Go-Kaliumkanäle eine wichtige Rolle bei der Aufrechterhaltung der Homöostase im Körper und sind daher ein aktives Forschungsgebiet in der Medizin und Biologie.
Gene Expression Regulation bezieht sich auf die Prozesse, durch die die Aktivität eines Gens kontrolliert und reguliert wird, um die Synthese von Proteinen oder anderen Genprodukten in bestimmten Zellen und Geweben zu einem bestimmten Zeitpunkt und in einer bestimmten Menge zu steuern.
Diese Regulation kann auf verschiedenen Ebenen stattfinden, einschließlich der Transkription (die Synthese von mRNA aus DNA), der Post-Transkriptionsmodifikation (wie RNA-Spleißen und -Stabilisierung) und der Translation (die Synthese von Proteinen aus mRNA).
Die Regulation der Genexpression ist ein komplexer Prozess, der durch verschiedene Faktoren beeinflusst wird, wie z.B. Epigenetik, intrazelluläre Signalwege und Umweltfaktoren. Die Fehlregulation der Genexpression kann zu verschiedenen Krankheiten führen, einschließlich Krebs, Entwicklungsstörungen und neurodegenerativen Erkrankungen.
Cyclo-AMP, auch bekannt als Cyclic Adenosinmonophosphat (cAMP), ist ein intrazellulärer second messenger, der an vielen zellulären Signaltransduktionswegen beteiligt ist. Es wird durch die Aktivität von Adénylylcyclasen synthetisiert und durch Phosphodiesterasen abgebaut. cAMP spielt eine wichtige Rolle in der Regulation von Stoffwechselvorgängen, Hormonwirkungen, Genexpression und Zellteilung.
In der medizinischen Forschung wird Cyclo-AMP oft als Marker für die Aktivität von Hormonen wie Adrenalin und Glucagon verwendet, die an den cAMP-Signalweg gekoppelt sind. Störungen im cAMP-Signalweg können mit verschiedenen Erkrankungen assoziiert sein, darunter Krebs, Herz-Kreislauf-Erkrankungen und neurologische Störungen.
Lokalspezifische Mutagenese bezieht sich auf einen Prozess der Veränderung der DNA in einer spezifischen Region oder Lokalität eines Genoms. Im Gegensatz zur zufälligen Mutagenese, die an beliebigen Stellen des Genoms auftreten kann, ist lokalspezifische Mutagenese gezielt auf eine bestimmte Sequenz oder Region gerichtet.
Diese Art der Mutagenese wird oft in der Molekularbiologie und Gentechnik eingesetzt, um die Funktion eines Gens oder einer Genregion zu untersuchen. Durch die Einführung gezielter Veränderungen in der DNA-Sequenz kann die Wirkung des Gens auf die Organismenfunktion oder -entwicklung studiert werden.
Lokalspezifische Mutagenese kann durch verschiedene Techniken erreicht werden, wie z.B. die Verwendung von Restriktionsendonukleasen, die gezielt bestimmte Sequenzmotive erkennen und schneiden, oder die Verwendung von Oligonukleotid-Primeren für die Polymerasekettenreaktion (PCR), um spezifische Regionen des Genoms zu amplifizieren und zu verändern.
Es ist wichtig zu beachten, dass lokalspezifische Mutagenese auch unbeabsichtigte Folgen haben kann, wie z.B. die Störung der Funktion benachbarter Gene oder Regulationssequenzen. Daher müssen solche Experimente sorgfältig geplant und durchgeführt werden, um unerwünschte Effekte zu minimieren.
In molecular biology, a base sequence refers to the specific order of nucleotides in a DNA or RNA molecule. In DNA, these nucleotides are adenine (A), cytosine (C), guanine (G), and thymine (T), while in RNA, uracil (U) takes the place of thymine. The base sequence contains genetic information that is essential for the synthesis of proteins and the regulation of gene expression. It is determined by the unique combination of these nitrogenous bases along the sugar-phosphate backbone of the nucleic acid molecule.
A 'Base Sequence' in a medical context typically refers to the specific order of these genetic building blocks, which can be analyzed and compared to identify genetic variations, mutations, or polymorphisms that may have implications for an individual's health, disease susceptibility, or response to treatments.
Enzyme Activation bezieht sich auf den Prozess, durch den ein Enzym seine katalytische Funktion aktiviert, um eine biochemische Reaktion zu beschleunigen. Dies wird in der Regel durch die Bindung eines spezifischen Moleküls, das als Aktivator oder Coenzym bezeichnet wird, an das Enzym hervorgerufen. Diese Bindung führt zu einer Konformationsänderung des Enzyms, wodurch seine aktive Site zugänglich und in der Lage wird, sein Substrat zu binden und die Reaktion zu katalysieren. Es ist wichtig zu beachten, dass es auch andere Mechanismen der Enzymaktivierung gibt, wie zum Beispiel die proteolytische Spaltung oder die Entfernung von Inhibitoren. Die Aktivierung von Enzymen ist ein essentieller Prozess in lebenden Organismen, da sie die Geschwindigkeit metabolischer Reaktionen regulieren und so das Überleben und Wachstum der Zellen gewährleisten.
Calciumkanäle sind in der Membran von Zellen lokalisierte Proteinkomplexe, die den Eintritt von Calcium-Ionen (Ca²+) aus dem Extrazellularraum oder aus dem Endoplasmatischen Retikulum (ER) in den Zytosol ermöglichen. Sie spielen eine wichtige Rolle bei der Regulation verschiedener zellulärer Prozesse, wie beispielsweise Muskelkontraktion, Erregbarkeit von Nervenzellen, Neurotransmitter-Release, Hormonsekretion und Zelldifferenzierung.
Es gibt verschiedene Arten von Calciumkanälen, die sich in ihrer Struktur, Funktion und Lokalisation unterscheiden. Die wichtigsten sind:
1. Voltage-gated Calciumkanäle (VGCCs): Diese Kanäle werden durch Änderungen des Membranpotentials aktiviert und ermöglichen den Ca²+-Einstrom aus dem Extrazellularraum in die Zelle. Sie sind an der Muskelkontraktion, Neurotransmitter-Freisetzung und der Aktivierung von Signalkaskaden beteiligt.
2. Rezeptor-operated Calciumkanäle (ROCCs): Diese Kanäle werden durch die Bindung von Neurotransmittern oder Hormonen an membranständige Rezeptoren aktiviert und ermöglichen den Ca²+-Einstrom aus dem Extrazellularraum in die Zelle. Sie sind wichtig für die Signalübertragung zwischen Zellen.
3. Store-operated Calciumkanäle (SOCCs): Diese Kanäle werden durch den Füllzustand des ER aktiviert und ermöglichen den Ca²+-Einstrom aus dem Extrazellularraum in die Zelle oder den Austritt von Ca²+ aus dem ER in den Zytosol. Sie sind an der Regulation der Calciumhomöostase beteiligt.
4. Second messenger-operated Calciumkanäle (SMOCCs): Diese Kanäle werden durch second messenger wie Cyclic AMP oder Inositoltrisphosphat (IP3) aktiviert und ermöglichen den Ca²+-Einstrom aus dem ER in den Zytosol. Sie sind an der Signalübertragung zwischen Zellen beteiligt.
Dysfunktionen der Calciumkanäle können zu verschiedenen Erkrankungen führen, wie beispielsweise neuromuskulären Erkrankungen, Herzrhythmusstörungen, Epilepsie und Krebs.
"Gene Expression" bezieht sich auf den Prozess, durch den die Information in einem Gen in ein fertiges Produkt umgewandelt wird, wie z.B. ein Protein. Dieser Prozess umfasst die Transkription, bei der die DNA in mRNA (messenger RNA) umgeschrieben wird, und die Translation, bei der die mRNA in ein Protein übersetzt wird. Die Genexpression kann durch verschiedene Faktoren beeinflusst werden, wie z.B. Epigenetik, intrazelluläre Signalwege und Umwelteinflüsse, was zu Unterschieden in der Menge und Art der produzierten Proteine führt. Die Genexpression ist ein fundamentaler Aspekt der Genetik und der Biologie überhaupt, da sie darüber entscheidet, welche Gene in einer Zelle aktiv sind und welche Proteine gebildet werden, was wiederum bestimmt, wie die Zelle aussieht und funktioniert.
Einwärts-gleichrichtende Kaliumkanäle (engl. inwardly rectifying potassium channels, kurz: Kir-Kanäle) sind eine Klasse von Ionenkanälen, die spezifisch für Kaliumionen (K+) sind und eine einwärts gerichtete Ionenleitung aufweisen. Das heißt, sie ermöglichen den Fluss von Kaliumionen bevorzugt in das Zellinnere, während der Ausfluss von Kaliumionen aus der Zelle behindert wird. Diese Eigenschaft macht sie unentbehrlich für die Aufrechterhaltung des Ruhemembranpotentials und die Regulation der Erregbarkeit von Zellen, insbesondere in Herzmuskel- und Nervenzellen. Mutationen in den Genen, die für diese Kaliumkanäle kodieren, können verschiedene Krankheiten verursachen, wie beispielsweise das Andersen-Tawil-Syndrom oder das Barter-Syndrom.
In der Medizin und Biochemie bezieht sich der Begriff "Binding Sites" auf die spezifischen Bereiche auf einer Makromolekül-Oberfläche (wie Proteine, DNA oder RNA), an denen kleinere Moleküle, Ionen oder andere Makromoleküle binden können. Diese Bindungsstellen sind oft konservierte Bereiche mit einer bestimmten dreidimensionalen Struktur, die eine spezifische und hochaffine Bindung ermöglichen.
Die Bindung von Liganden (Molekülen, die an Bindungsstellen binden) an ihre Zielproteine oder Nukleinsäuren spielt eine wichtige Rolle in vielen zellulären Prozessen, wie z.B. Enzymfunktionen, Signaltransduktion, Genregulation und Arzneimittelwirkungen. Die Bindungsstellen können durch verschiedene Methoden wie Röntgenkristallographie, Kernspinresonanzspektroskopie oder computergestützte Modellierung untersucht werden, um mehr über die Wechselwirkungen zwischen Liganden und ihren Zielmolekülen zu erfahren.
Lumineszenzproteine sind Proteine, die Licht emittieren, wenn sie angeregt werden. Dies kann auf zwei Arten passieren: durch Chemilumineszenz oder Biolumineszenz. Bei der Chemilumineszenz reagiert ein Substrat mit dem Protein und setzt Energie frei, die das Protein in einen angeregten Zustand versetzt. Wenn das Protein dann zurück in seinen Grundzustand übergeht, emittiert es Licht. Bei der Biolumineszenz hingegen erzeugt ein Enzym (meistens Luciferase) durch eine chemische Reaktion mit einem Luciferin-Molekül und Sauerstoff Licht. Diese Art der Lumineszenz wird von lebenden Organismen wie Glühwürmchen oder Leuchtkalmaren genutzt, um zu kommunizieren, sich fortzubewegen oder Beute anzulocken. In der Medizin und Biologie werden lumineszierende Proteine oft als Reportergen-Systeme eingesetzt, um die Aktivität von Genen oder Proteinen in lebenden Zellen zu verfolgen.
In der Biochemie und Pharmakologie, ist ein Ligand eine Molekül oder ion, das an eine andere Molekül (z.B. ein Rezeptor, Enzym oder ein anderes Ligand) bindet, um so die räumliche Konformation oder Aktivität des Zielmoleküls zu beeinflussen. Die Bindung zwischen dem Liganden und seinem Zielmolekül erfolgt in der Regel über nicht-kovalente Wechselwirkungen wie Wasserstoffbrückenbindungen, Van-der-Waals-Kräfte oder elektrostatische Kräfte.
Liganden können verschiedene Funktionen haben, je nachdem, an welches Zielmolekül sie binden. Beispielsweise können Agonisten Liganden sein, die die Aktivität des Zielmoleküls aktivieren oder verstärken, während Antagonisten Liganden sind, die die Aktivität des Zielmoleküls hemmen oder blockieren. Einige Liganden können auch allosterisch wirken, indem sie an eine separate Bindungsstelle auf dem Zielmolekül binden und so dessen Konformation und Aktivität beeinflussen.
Liganden spielen eine wichtige Rolle in der Signaltransduktion, bei Stoffwechselprozessen und in der Arzneimitteltherapie. Die Bindung von Liganden an ihre Zielmoleküle kann zu einer Vielzahl von biologischen Effekten führen, einschließlich der Aktivierung oder Hemmung enzymatischer Reaktionen, der Modulation von Ionenkanälen und Rezeptoren, der Regulierung genetischer Expression und der Beeinflussung zellulärer Prozesse wie Zellteilung und Apoptose.
Endocytosis ist ein Prozess der Zellmembran, bei dem extrazelluläre Substanzen oder Partikel durch Einstülpung der Plasmamembran in die Zelle aufgenommen werden. Dies führt zur Bildung von Vesikeln, die die aufgenommenen Materialien einschließen und dann in das Zellinnere transportiert werden. Es gibt zwei Haupttypen der Endocytosis: Phagocytose, bei der große Partikel wie Bakterien oder Fremdkörper internalisiert werden, und Pinocytose (oder Fluidphasen-Endocytosis), bei der kleinere Moleküle in Form von Flüssigkeit und gelösten Substanzen aufgenommen werden. Die endozellulären Vesikel mit den aufgenommenen Materialien können dann mit lysosomalen Vesikeln fusionieren, um die Inhalte abzubauen und für zelluläre Zwecke zu nutzen. Endocytosis ist ein wichtiger Mechanismus für Zellen, um Nährstoffe aufzunehmen, Krankheitserreger zu bekämpfen, Signalmoleküle zu verarbeiten und das extrazelluläre Milieu zu regulieren.
Kaliumkanäle sind Membranproteine in der Zellmembran von Zellen, die für den Transport von Kalium-Ionen (K+) über die Lipidbilayer der Zelle verantwortlich sind. Sie spielen eine wichtige Rolle bei der Regulierung des Ruhepotentials von Zellen und sind an der Erzeugung und Übertragung von Aktionspotentialen beteiligt, die für die elektrische Signalübertragung in Nerven- und Muskelzellen notwendig sind. Kaliumkanäle können durch verschiedene Faktoren wie Spannung, Ligandenbindung oder Phosphorylierung aktiviert werden und zeichnen sich durch eine hohe Selektivität für Kalium-Ionen aus. Es gibt verschiedene Arten von Kaliumkanälen, die sich in ihrer Aktivierungsweise, ihrem Aufbau und ihrer Verteilung unterscheiden, wie beispielsweise spannungsabhängige Kaliumkanäle, ligandenaktivierte Kaliumkanäle oder Kaliumkanäle, die durch intrazelluläre Signalwege reguliert werden.
Fluorescence Microscopy ist eine Form der Lichtmikroskopie, die auf der Fluoreszenzeigenschaft bestimmter Moleküle, sogenannter Fluorophore, basiert. Diese Fluorophore absorbieren Licht einer bestimmten Wellenlänge und emittieren dann Licht mit einer längeren Wellenlänge, was als Fluoreszenz bezeichnet wird. Durch die Verwendung geeigneter Filter können diese Fluoreszenzemissionen von dem ursprünglich absorbierten Licht getrennt und visuell dargestellt werden.
In der biomedizinischen Forschung werden Fluorophore häufig an Biomoleküle wie Proteine, Nukleinsäuren oder kleine Moleküle gebunden, um ihre Verteilung, Lokalisation und Interaktionen in Zellen und Geweben zu untersuchen. Durch die Kombination von Fluoreszenzmikroskopie mit verschiedenen Techniken wie Konfokalmikroskopie, Superauflösungsmikroskopie oder Fluoreszenzlebensdauer-Mikroskopie können hochaufgelöste und spezifische Bilder von biologischen Proben erzeugt werden.
Fluorescence Microscopy hat sich zu einem unverzichtbaren Werkzeug in der Zellbiologie, Neurobiologie, Virologie, Onkologie und anderen Forschungsbereichen entwickelt, um die Funktion und Dynamik von Biomolekülen in lebenden Systemen zu verstehen.
Natriumkanäle sind membranständige Proteinkomplexe, die den selektiven Transport von Natriumionen (Na+) durch Zellmembranen ermöglichen. Sie spielen eine entscheidende Rolle in der Erregungsbildung und -weiterleitung im Nervensystem, sowie in der Kontraktion von Muskelzellen.
Natriumkanäle bestehen aus einer porebildenden α-Untereinheit und können zusätzlich durch β-Untereinheiten moduliert werden. Die α-Untereinheit enthält die Natriumionen-selektive Pore und ist für die Konformationen des Kanals verantwortlich, die den Ionenfluss steuern.
Die Kanäle können zwischen offener, inaktiver und geschlossener Konformation wechseln. In der Ruhephase befindet sich der Kanal in einer geschlossenen Konformation, wodurch der unkontrollierte Einstrom von Natriumionen in die Zelle verhindert wird. Durch Änderungen des Membranpotentials oder durch Bindung von Liganden kann der Kanal aktiviert werden, wodurch sich die Pore öffnet und Natriumionen einströmen können. Anschließend geht der Kanal in eine inaktive Konformation über, in der er für kurze Zeit nicht mehr aktivierbar ist.
Natriumkanäle sind Ziele für verschiedene pharmakologische Substanzen, wie beispielsweise Lokalanästhetika und Antiarrhythmika, die den Ionenfluss durch den Kanal modulieren oder blockieren können.
Fluoreszenz-Resonanz-Energietransfer (FRET) ist ein physikalischer Prozess, bei dem die Energie eines angeregten Fluorophores (fluoreszierender Molekülfarbstoff) auf ein anderes nahegelegenes Molekül übertragen wird, das als Akzeptormolekül bezeichnet wird. Diese Energieübertragung erfolgt durch nichtstrahlende Prozesse und bewirkt, dass das Akzeptormolekül in einen angeregten Zustand versetzt wird und anschließend möglicherweise emittiert.
Die FRET-Effizienz hängt von der Überlappung der Emissionsspektren des Fluorophors (Donor) mit den Absorptionsspektren des Akzeptors ab, sowie von der räumlichen Nähe zwischen Donor und Akzeptor. Die kritische Entfernung für FRET liegt typischerweise im Bereich von 1 bis 10 Nanometern.
In der Biochemie und Molekularbiologie wird FRET oft eingesetzt, um Protein-Protein-Wechselwirkungen oder Konformationsänderungen in Biomolekülen zu untersuchen. Dazu werden Fluorophore mit verschiedenen Emissionsspektren an die Biomoleküle gekoppelt und die Energieübertragung zwischen den Fluorophoren wird beobachtet, um Rückschlüsse auf räumliche Nähe oder Konformationsänderungen zu ziehen.
Glycosylation ist ein Prozess der Post-translationalen Modifikation von Proteinen und Lipiden, bei dem Zuckermoleküle (Kohlenhydrate) an diese Moleküle angehängt werden. Dies geschieht durch die Kombination von Zuckerresten mit Aminosäuren oder Fettsäuren über eine Glycosidische Bindung.
Es gibt zwei Hauptarten der Protein-Glycosylierung: N-Glykosylierung und O-Glykosylierung. Bei der N-Glykosylierung wird ein Glucose-Rest an den Aminostickstoff einer Asparagin-Seitenkette gebunden, während bei der O-Glykosylierung ein Zuckerrest an den Hydroxyl-Sauerstoff einer Serin- oder Threonin-Seitenkette angehängt wird.
Die Glycosylierung spielt eine wichtige Rolle in vielen biologischen Prozessen, wie der Proteinfaltung und -stabilität, Zell-Zell-Interaktionen, Signaltransduktion, Immunantworten und der Protease-Resistenz von Proteinen. Abnormalitäten im Glycosylierungsprozess können mit verschiedenen Krankheiten assoziiert sein, wie Krebs, Entzündungen, Infektionskrankheiten und Stoffwechselstörungen.
COS-Zellen sind eine häufig in der Molekularbiologie verwendete Zelllinie, die aus embryonalen Fibroblasten des Afrikanischen Grünen Meerkatzenaffens (Cercopithecus aethiops) gewonnen wird. Das "COS" in COS-Zellen steht für "CV-1 in Origin mit dem shuttle vector SV40" (CV-1 ist eine Affennierenzelllinie und SV40 ist ein simianes Virus 40).
COS-Zellen sind transformierte Zellen, die das große T-Antigen des SV40-Virus exprimieren, was ihnen ermöglicht, rekombinante DNA mit eingebetteten SV40-Promotoren aufzunehmen und effizient zu expressieren. Diese Eigenschaft macht COS-Zellen zu einem wertvollen Werkzeug für die Expression und Analyse von Fremdgenen in vitro.
Es gibt zwei Haupttypen von COS-Zellen, die häufig verwendet werden: COS-1 und COS-7. COS-1-Zellen haben eine normale Chromosomenzahl (diploid), während COS-7-Zellen ein erhöhtes chromosomales Nummer (polyploid) aufweisen. Beide Zelllinien werden oft für die Transfektion und Expression von Plasmiden verwendet, um rekombinante Proteine herzustellen oder die Funktionen bestimmter Gene zu untersuchen.
Die NAV1.5 Voltage-Gated Sodium Channel, auch bekannt als SCN5A, ist ein spezifisches Ionenschannel in den Membranen von Herzmuskelzellen (Kardiomyozyten). Es handelt sich um ein spannungsgesteuertes Natriumkanalprotein, das für die Einwärtsströmung von Natrium-Ionen (Na+) während der Erregungsausbreitung im Herzen verantwortlich ist. Diese Natriumkanäle spielen eine wichtige Rolle bei der Entstehung und Übertragung von Aktionspotentialen in Herzmuskelzellen, was wiederum für die normale Kontraktion des Herzens notwendig ist.
Mutationen oder Veränderungen im SCN5A-Gen können zu verschiedenen kardialen Erkrankungen führen, wie z.B. angeborene Herzrhythmusstörungen (z.B. das Brugada-Syndrom und das Long QT-Syndrom Typ 3) oder angeborene Kanalopathien, die mit Herzrhythmusstörungen einhergehen. Die Untersuchung dieser Natriumkanäle ist von großer Bedeutung für das Verständnis der Pathophysiologie kardialer Erkrankungen und für die Entwicklung neuer therapeutischer Strategien zur Behandlung von Herzrhythmusstörungen.
Biotinylierung ist ein chemischer Prozess, bei dem Biotin, auch bekannt als Vitamin B7 oder Vitamin H, kovalent an Proteine, DNA, Lipide oder kleine Moleküle gebunden wird. Dieser Vorgang ermöglicht die Verwendung dieser biotinylierten Moleküle in verschiedenen biochemischen und molekularbiologischen Anwendungen, wie beispielsweise der Affinitätschromatographie, der Fluoreszenzmarkierung oder der Elektronenmikroskopie. Die Biotinylierung nutzt aus, dass Biotin spezifisch an Avidin oder Streptavidin bindet, was eine sehr starke nichtkovalente Bindung mit einer Gleitkommadissociationskonstante (Kd) in der Größenordnung von 10-15 M darstellt. Diese enge Bindung ermöglicht die Isolierung und Detektion von biotinylierten Molekülen in komplexen biologischen Systemen.
Spannungsabhängige Kaliumkanäle sind ein Typ von Ionenkanälen, die spezifisch für Kalium-Ionen (K+) sind und deren Öffnung oder Schließung von der Membranspannung abhängt. Diese Kanäle spielen eine wichtige Rolle in der Regulierung der Membranpotenzial-Ausgleichsströme in verschiedenen Zelltypen, einschließlich Nerven- und Muskelzellen.
Im Ruhezustand sind spannungsabhängige Kaliumkanäle geöffnet und ermöglichen so den Ausstrom von Kalium-Ionen aus der Zelle. Wenn die Membranspannung durch einen Aktionspotenzial-generierenden Stimulus erhöht wird, ändert sich die Konformation des Kanals und er schließt sich, was zu einer Abnahme des Kalium-Ionenflusses führt.
Spannungsabhängige Kaliumkanäle werden in verschiedene Unterklassen eingeteilt, wie z.B. Kv (Voltage-gated potassium channel), KCNQ und SK (Small conductance calcium-activated potassium channel). Mutationen in den Genen, die für spannungsabhängige Kaliumkanäle codieren, können zu verschiedenen Erkrankungen führen, wie z.B. Epilepsie, Schlaganfall, Herzrhythmusstörungen und Taubheit.
Cyclo-AMP (3',5'-cyclische Adenosinmonophosphat)-abhängige Proteinkinasen sind Enzyme, die Adenosintriphosphat (ATP) hydrolysieren, um eine Phosphatgruppe auf bestimmte Proteine zu übertragen und diese so aktivieren. Sie werden durch das second messenger Cyclo-AMP reguliert, der bei verschiedenen zellulären Signaltransduktionswegen eine wichtige Rolle spielt.
Die Aktivierung von Cyclo-AMP-abhängigen Proteinkinasen erfolgt durch die Bindung von Cyclo-AMP an die Regulatorische Untereinheit (R-Untereinheit) der Kinase, was zu einer Konformationsänderung führt und die katalytische Untereinheit (C-Untereinheit) aktiviert. Die aktivierte Kinase kann dann Phosphatgruppen auf spezifische Serin- oder Threoninreste von Proteinen übertragen, was deren Aktivität beeinflusst und so verschiedene zelluläre Prozesse wie Stoffwechsel, Genexpression und Zellteilung reguliert.
Eine der bekanntesten Cyclo-AMP-abhängigen Proteinkinasen ist die Proteinkinase A (PKA), die aus zwei katalytischen Untereinheiten und zwei regulatorischen Untereinheiten besteht. Andere Beispiele sind die Cyclische GMP-abhängige Proteinkinase (PKG) und die Exchange Factor directly Activated by cAMP (Epac).
Aminosäuresubstitution bezieht sich auf den Prozess, bei dem ein anderes Aminosäurerestmolekül in einen Proteinstrukturstrang eingebaut wird, anstelle des ursprünglichen Aminosäurerests an einer bestimmten Position. Dies tritt auf, wenn es eine genetische Variante oder Mutation gibt, die dazu führt, dass ein anderes Aminosäure codiert wird, was zu einer Veränderung der Aminosäurensequenz im Protein führt. Die Fähigkeit eines Proteins, seine Funktion aufrechtzuerhalten, nachdem eine Aminosäuresubstitution stattgefunden hat, hängt von der Art und Position der substituierten Aminosäure ab. Manche Substitutionen können die Proteinstruktur und -funktion beeinträchtigen oder sogar zerstören, während andere möglicherweise keine Auswirkungen haben.
Die GTP-Bindungsprotein-α-Subunits, Gq-G11, sind eine Unterfamilie von G protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs) in der Medizin und Biologie. Sie sind heterotrimere G-Proteine, die aus α-, β- und γ-Untereinheiten bestehen. Die α-Untereinheit ist das aktive Kernstück des Proteins und bindet an Guanosindiphosphat (GDP) oder Guanosintriphosphat (GTP).
Die Gq-G11-Subfamilie umfasst vier Isoformen: Gαq, Gα11, Gα14 und Gα15/Gα16. Diese Proteine sind an der Signaltransduktion von vielen wichtigen Zellfunktionen beteiligt, wie zum Beispiel die Regulation des Calcium-Haushalts, die Aktivierung von Phospholipase C und die Modulation von Ionenkanälen.
Mutationen in den GTP-Bindungsprotein-α-Subunits, Gq-G11, können zu verschiedenen Erkrankungen führen, wie zum Beispiel zur familiären autosomal-dominanten Hyperkalzämie (FADH) und zum multiplen endokrinen Neoplasie Typ 1 (MEN1)-Syndrom. Diese Krankheiten sind mit einer Überaktivität der Gq-G11-Proteine assoziiert, was zu einer unkontrollierten Aktivierung von Signalwegen führt und somit zu verschiedenen Symptomen wie Hyperkalzämie, Knochenschmerzen und Tumoren.
Lymphocyte Antigen 96, auch bekannt als LAIR-1 oder CD305, ist ein Protein, das auf der Oberfläche von Lymphozyten (eine Art weißer Blutkörperchen) gefunden wird. Es handelt sich um ein Rezeptorprotein, das an Kollegen bindet, die als Kollagen-artige Moleküle bekannt sind und auf der Oberfläche von Zellen im Immunsystem vorkommen. Die Aktivierung des LAIR-1-Rezeptors durch seine Liganden kann die Aktivität von Lymphozyten hemmen und so das Immunsystem regulieren. Es ist wichtig darauf hinzuweisen, dass meine Kenntnisse aus dem Jahr 2021 stammen und weitere Forschungen zu diesem Thema stattgefunden haben können.
CHO-Zellen, oder Chinese Hamster Ovary Zellen, sind eine Zelllinie, die aus den Eierstöcken eines chinesischen Hamsters gewonnen wurde. Sie werden häufig in der biologischen und medizinischen Forschung eingesetzt, insbesondere in der Proteinproduktion und -charakterisierung. CHO-Zellen haben die Fähigkeit, glykosylierte Proteine zu produzieren, was sie zu einem wertvollen Instrument für die Herstellung von rekombinanten Proteinen macht, die für therapeutische Zwecke verwendet werden können. Darüber hinaus sind CHO-Zellen ein beliebtes Modellsystem für das Studium der zellulären Physiologie und Pathophysiologie.
Calcium Signaling bezieht sich auf den kontrollierten und komplexen Prozess der intrazellulären Kalziumionen-Konzentrationsänderungen, die als Signal zur Regulation einer Vielzahl von zellulären Funktionen dienen. Diese Funktionen umfassen Kontraktion von Muskelzellen, Neurotransmitter-Release in Nervenzellen, Hormonsekretion in endokrinen Zellen, Genexpression und Zelldifferenzierung sowie -apoptose.
Das Calcium Signaling wird durch die Freisetzung von Kalziumionen aus intrazellulären Speichern wie dem Endoplasmatischen Retikulum (ER) oder durch den Eintritt von Kalziumionen aus dem Extrazellularraum in die Zelle aktiviert. Die Konzentration von Kalziumionen im Cytoplasma wird normalerweise auf niedrigem Niveau gehalten, und Änderungen der Konzentration werden durch eine Reihe von Mechanismen reguliert, darunter Calcium-bindende Proteine, Calcium-Kanäle und Calcium-Pumpen.
Die Kalziumsignale können in Amplitude, Dauer und räumlicher Verteilung variieren, was zu unterschiedlichen zellulären Antworten führt. Die Integration und Interpretation dieser Signale sind entscheidend für die korrekte Funktion der Zelle und des Organismus als Ganzes. Störungen im Calcium Signaling können mit verschiedenen Krankheiten verbunden sein, wie z.B. neurologischen Erkrankungen, Muskelerkrankungen, Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Krebs.
GTP-bindende Proteine sind eine Klasse von Proteinen, die Guanosintriphosphat (GTP) binden und hydrolysieren können. Diese Proteine spielen eine wichtige Rolle in der Regulation zellulärer Prozesse wie Signaltransduktion, Proteinbiosynthese, intrazellulärer Transport und Zytoskelett-Dynamik.
Die Bindung von GTP an diese Proteine führt oft zu einer Konformationsänderung, die deren Aktivität moduliert. Durch Hydrolyse des gebundenen GTP zu Guanosindiphosphat (GDP) und Phosphat wird die ursprüngliche Konformation wiederhergestellt und die Aktivität des Proteins beendet.
Ein Beispiel für ein GTP-bindendes Protein ist das Ras-Protein, das eine Schlüsselrolle in der Signaltransduktion von Wachstumsfaktoren spielt. Mutationen in Ras-Proteinen, die zu einer konstant aktiven Form führen, wurden mit verschiedenen Krebsarten in Verbindung gebracht.
Eine Missense-Mutation ist ein spezifischer Typ von Genmutation, bei der ein einzelner Nukleotid (DNA-Basenpaar) ausgetauscht wird, was dazu führt, dass ein anderes Aminosäure-Restmolekül anstelle des ursprünglichen eingebaut wird. Dies kann zu einer Veränderung der Proteinstruktur und -funktion führen, die je nach Art und Ort der Mutation im Genom variieren kann. Manchmal können Missense-Mutationen die Proteinfunktion beeinträchtigen oder sogar vollständig aufheben, was zu verschiedenen Krankheiten oder Fehlbildungen führen kann. Es ist wichtig zu beachten, dass nicht alle Missense-Mutationen pathogen sind und einige von ihnen möglicherweise keine Auswirkungen auf die Proteinfunktion haben.
Ein Kv1.5-Kaliumkanal ist ein spezifischer Typ von Kaliumkanal, der in Herzmuskelzellen und anderen Geweben vorkommt. Genauer gesagt handelt es sich um einen spannungsaktivierten Kaliumkanal, der durch eine Änderung des Membranpotentials geöffnet wird. Die Aktivierung dieses Kanals führt zu einer Kalium-Auswärtsströmung, was wiederum dazu beiträgt, das Membranpotential zurück zur Ruhemembranpotentialien zu bringen.
Der Kv1.5-Kaliumkanal spielt eine wichtige Rolle bei der Regulation der Herzfrequenz und der Erregungsausbreitung im Herzen. Mutationen in dem Gen, das für den Kv1.5-Kanal codiert (KCNA5), können zu Herzrhythmusstörungen führen, wie z.B. das sogenannte "Long QT Syndrom", welches mit einem erhöhten Risiko für Kammerflimmern und plötzlichen Herztod einhergehen kann.
Daher sind Kv1.5-Kaliumkanäle ein wichtiges Ziel für die pharmakologische Behandlung von Herzrhythmusstörungen, und es werden aktiv Forschungen betrieben, um neue Medikamente zu entwickeln, die gezielt diese Kanäle modulieren können.
Ich bin sorry, aber Hamsters sind keine medizinischen Begriffe oder Konzepte. Ein Hamster ist ein kleines Säugetier, das zur Familie der Cricetidae gehört und oft als Haustier gehalten wird. Es gibt viele verschiedene Arten von Hamstern, wie zum Beispiel den Goldhamster oder den Dsungarischen Hamster. Wenn Sie weitere Informationen über Hamster als Haustiere oder ihre Eigenschaften und Verhaltensweisen wünschen, kann ich Ihnen gerne weiterhelfen.
Neuronen sind spezialisierte Zellen des Nervengewebes, die für die Informationsverarbeitung und -übertragung im Zentralnervensystem (Gehirn und Rückenmark) sowie im peripheren Nervensystem verantwortlich sind. Sie bestehen aus drei Hauptkompartimenten: dem Zellkörper (Soma), den Dendriten und dem Axon.
Der Zellkörper enthält den Zellkern und die zytoplasmatische Matrix, während die Dendriten verzweigte Strukturen sind, die von dem Zellkörper ausgehen und der Reizaufnahme dienen. Das Axon ist ein langer, meist unverzweigter Fortsatz, der der Informationsübertragung über große Distanzen dient. Die Enden des Axons, die Axonterminalen, bilden Synapsen mit anderen Neuronen oder Zielstrukturen wie Muskeln oder Drüsen aus.
Neuronen können verschiedene Formen und Größen haben, abhängig von ihrer Funktion und Lokalisation im Nervensystem. Die Kommunikation zwischen Neuronen erfolgt durch die Ausschüttung und Aufnahme von chemischen Botenstoffen, den Neurotransmittern, über spezialisierte Kontaktstellen, den Synapsen. Diese komplexe Architektur ermöglicht die Integration und Verarbeitung sensorischer, kognitiver und emotionaler Informationen sowie die Koordination von Bewegungen und Verhaltensweisen.
Carrierproteine, auch als Transportproteine bekannt, sind Moleküle, die die Funktion haben, andere Moleküle oder Ionen durch Membranen zu transportieren. Sie spielen eine wichtige Rolle im Stoffwechsel von Zellen und im interzellulären Kommunikationsprozess. Carrierproteine sind in der Lage, Substanzen wie Zucker, Aminosäuren, Ionen und andere Moleküle selektiv zu binden und diese durch die Membran zu transportieren, indem sie einen Konformationswandel durchlaufen.
Es gibt zwei Arten von Carrierproteinen: uniporter und symporter/antiporter. Uniporter transportieren nur eine Art von Substanz in eine Richtung, während Symporter und Antiporter jeweils zwei verschiedene Arten von Substanzen gleichzeitig in die gleiche oder entgegengesetzte Richtung transportieren.
Carrierproteine sind von großer Bedeutung für den Transport von Molekülen durch Zellmembranen, da diese normalerweise nicht-polar und lipophil sind und somit nur unpolare oder lipophile Moleküle passiv durch Diffusion durch die Membran transportieren können. Carrierproteine ermöglichen es so, auch polare und hydrophile Moleküle aktiv zu transportieren.
Biologischer Transport bezieht sich auf die kontrollierten Prozesse des Transports von Molekülen, Ionen und anderen wichtigen Substanzen in und aus Zellen oder zwischen verschiedenen intrazellulären Kompartimenten in lebenden Organismen. Diese Vorgänge sind für das Überleben und die Funktion der Zelle unerlässlich und werden durch passive Diffusion, aktiven Transport, Endo- und Exozytose sowie Durchfluss in Blutgefäßen ermöglicht.
Die passive Diffusion ist ein passiver Prozess, bei dem Moleküle aufgrund ihres Konzentrationsgradienten durch die semipermeable Zellmembran diffundieren. Aktiver Transport hingegen erfordert Energie in Form von ATP und beinhaltet den Einsatz von Transportern oder Pumpen, um Moleküle gegen ihren Konzentrationsgradienten zu transportieren.
Endo- und Exozytose sind Formen des Vesikeltransports, bei denen Substanzen durch Verschmelzung von Membranbläschen (Vesikeln) mit der Zellmembran aufgenommen oder abgegeben werden. Der Durchfluss in Blutgefäßen ist ein weiterer wichtiger Transportmechanismus, bei dem Nährstoffe und andere Substanzen durch die Gefäßwand diffundieren und so verschiedene Gewebe und Organe erreichen.
HEK-Zellen
Frank L. Graham
Transfektion
Clemizol
Alex J. van der Eb
AZD1222
Line4
- Characteristics of a Human Cell Line Transformed by DNA from Human Adenovirus Type 5. (wikipedia.org)
- Cloning and Sequencing of the Cellular-Viral Junctions from the Human Adenovirus Type 5 Transformed 293 Cell Line. (wikipedia.org)
- Download the cell line authentication demo report. (multiplexion.de)
- Get a list of all cell lines included in our cell line data base. (multiplexion.de)